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細胞流式檢測:給細胞貼上“身份標簽”
發(fā)布時間: 2026-01-28 點擊次數(shù): 30次在現(xiàn)代生命科學研究中,科學家們常常需要同時分析成千上萬個細胞的多種特性,如大小、內(nèi)部結(jié)構(gòu)和特定蛋白的表達水平。細胞流式檢測(FlowCytometry)技術(shù)應運而生,它如同一臺高速“細胞掃描儀”,讓研究者能夠精確、高通量地解析復雜的細胞群體。??工作原理流式細胞儀的工作流程可概括為“排隊、照射、計數(shù)”:單細胞懸液制備:通過酶消化、過濾等方法獲得單細胞懸液,并去除細胞團塊和雜質(zhì)。熒光標記:使用熒光染料或特異性抗體標記細胞。例如,用DAPI標記細胞核,用熒光抗體標記特定蛋白。鞘流聚焦:細胞懸液在鞘液的包裹下,以單列形式通過檢測區(qū),確保逐個通過激光束。信號采集:當細胞通過激光束時,會產(chǎn)生散射光(前向散射光FSC反映細胞大小,側(cè)向散射光SSC反映細胞內(nèi)部復雜度)和熒光信號。探測器將這些光信號轉(zhuǎn)換為電信號。數(shù)據(jù)分析:計算機軟件根據(jù)信號的強度和分布,生成散點圖和直方圖,從而對細胞進行分群和定量分析。??主要應用場景細胞流式檢測的應用極為廣泛:免疫學研究:分析外周血、淋巴組織中各類免疫細胞(T細胞、B細胞、NK細胞等)的比例和功能狀態(tài)。腫瘤學:檢測腫瘤細胞表面標志物,用于腫瘤分型、微小殘留病(MRD)監(jiān)測和免疫治療療效評估。干細胞與發(fā)育生物學:鑒定和分選不同發(fā)育階段的干細胞和祖細胞。細胞周期與凋亡分析:通過特定染料評估細胞周期進程和細胞凋亡情況。功能與藥物篩選:研究藥物對細胞增殖、凋亡、信號通路等的影響。??技術(shù)特點與發(fā)展流式細胞術(shù)具有高通量、多參數(shù)、高速度和高精度的特點。近年來,隨著技術(shù)的發(fā)展,流式細胞儀的性能不斷提升:多色分析:可同時檢測十幾種甚至幾十種熒光信號,極大豐富了信息維度。高參數(shù)流式:通過增加檢測參數(shù),更精細地解析細胞亞群。質(zhì)譜流式(CyTOF):用金屬同位素代替熒光染料,突破了熒光光譜重疊的限制,可實現(xiàn)上百個參數(shù)的檢測。成像流式:在獲取散射光和熒光信號的同時,提供細胞圖像,兼顧形態(tài)與功能信息。

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